碳源和酶试验

时间：2023-03-25 14:11:12来源：food栏目：食品快速检测阅读：

碳源和酶试验

[db:作者] / 2022-11-29 00:00

碳源利用试验

有的细菌如产气杆菌，能利用枸橼酸盐为碳源，因此，能在枸橼酸盐培养基上生长，并分解构橼酸盐使培养基变为碱性。培养基中的溴麝香草继猪示剂由绿色变为深蓝色。不能利用枸橼酸盐为碳源的细菌，在该培养基上不生长，培养基不变色。碳源利用试验用于肠杆菌种中菌属间的鉴定，埃希氏菌属、志贺氏菌属、爱德华氏菌属、摩根氏菌属为阴性，其他菌属多为阳性。

酶试验

1.硝酸盐还原试验有些细菌具有还原硝酸盐的能力，可将硝酸盐还原为亚硝酸盐、氨或氮气等。亚硝酸盐的存在可用硝酸试剂检验。

试验方法：将磺胺酸冰醋酸溶液和a-萘胺乙醇溶液各0.2mL等量混合，取混合试剂约0.1ml加于液体培养物或琼脂斜面培养物表面，10min内呈现红色即为阳性。

用a-萘胺进行试验时，阳性反应产生的红色消退得很快，加入后应立即判定结果。进行试验时必须有未接种的培养基管作为阴性对照。a-萘胺具有致癌性，使用时应加注意。

2.尿素酶试验有些细菌能产生尿素酶，将尿素分解产生2个分子的氨，使培养基pH升高，酚红指示剂变红，见彩图3。

试验方法：挑取待测菌接种于液体培养基中，摇匀，于(36±1)℃培养10min、60min和120min，分别观察结果；或涂布并穿刺接种于琼脂斜面，不要到达底部，留底部作变色对照。培养2h、4h和24h分别观察结果，如阴性应继续培养至第4天作最终判定。

3.氧化酶试验氧化酶即细胞色素氧化酶，氧化酶先使细胞色素c氧化，然后此氧化型细胞色素c再使对苯二胺氧化，产生颜色反应。

试验方法：在琼脂斜面培养物上或琼脂平板菌落上滴加试剂1～2滴，或用接种环将菌落涂布在氧化酶试纸上，阳性30s内变蓝色，阴性者无颜色改变。注意避免含铁物质。

4.明胶液化试验有些细菌具有明胶酶(亦称类蛋白水解酶)，能将明胶先水解为多肽，又进一步水解为氨基酸，失去凝胶性质而液化。

试验方法：挑取18～24h培养物，以较大量穿刺接种于明胶高层约2/3深度或点种于平板培养基。于20～22℃培养7～14d。明胶高层亦可培养于(36±1)℃。每天观察结果，若因培养温度高而使明胶本身液化时应不加摇动，静置冰箱中待其凝固后，再观察其是否被细菌液化，如确定被液化，即为试验阳性。平板试验结果的观察为在培养基平板点种的菌落上滴加试剂，若为阳性，10～20min后，菌落周围应出现清晰带环。否则为阴性。

5.凝固酶试验致病性葡萄球菌可产生两种凝固酶：一种是结合凝固酶，结合在细胞壁上，使血浆中的纤维蛋白原变成纤维蛋白而附着于细菌表面，发生凝集，可用玻片法测出；另一种是分泌至菌体外的游离凝固酶。作用类似凝血酶原物质，可被血浆中的协同因子激活变为凝血酶样物质，而使纤维蛋白原变成纤维蛋白，从而使血浆凝固，可用试管法测出。

文章来源：《农产品质量安全检测》

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