大环内酯类和林可胺类药物残留测定方法——液相色谱-质谱法

时间：2023-03-25 06:16:42来源：food栏目：食品快速检测阅读：

大环内酯类和林可胺类药物残留测定方法——液相色谱-质谱法

[db:作者] / 2022-12-12 00:00

(6)液相色谱-质谱法(LC-MS)

一般在多残留分析中，尤其是进行液质联用分析中，可以将林可胺类和MALs进行同时分析，且能够满足兽药残留分析的要求，极大的提高样品通量，减少实验室前处理的工作量。

Thompson等建立了LC-大气压化学电离(APCI)-MS法检测蜂蜜中的林可霉素和泰乐菌素。

采用反相色谱C8分析柱，流动相分别为0.1%三氟乙酸-乙腈和0.1%三氟乙酸-水，梯度洗脱模式，流速为0.5mL/min。质谱条件中探针温度为550℃，离子源温度为150℃。定量分析中采取选择性离子监测(SIM)模式。该方法中林可霉素和泰乐菌素的平均回收率为84%～107%，林可霉素的LOD为0.007ug/g，泰乐菌素的LOD为0.01μg。徐锦忠等建立了蜂蜜中MALs抗生素：红霉素、罗红霉素、替米卡星、泰乐菌素、北里霉素、交沙霉素、竹桃霉素及螺旋霉素I的高效液相色谱-电喷雾-串联质谱(LC-ESI-MS/MS)检测方法。样品经0.1mol/L Na2CO3-NaHCO3(pH9.3)提取，OasisHLB固相萃取柱净化，反相液相色谱分离后进行质谱分析。在选择反应监测模式(SRM)下进行特征母离子子离子对信号采集。根据保留时间和母离子及两个特征子离子信息进行定性分析，以基峰离子进行定量。MALs残留的LOD为0.2ug/kg，LOQ为1.0ug/kg；在5.0～200μg/L时峰强度与质量浓度的线性关系良好(R2>0.99)。Benetti等建立了蜂蜜中泰乐菌素残留的LC-MS/MS检测方法。利用Tris缓冲液进行提取，HLB固相萃取柱进行净化处理，C18柱进行分离，0.01mol/L乙酸铵和乙腈作为流动相，流速为0.25mL/min。方法确证参数CCa<3ng/g，CCβ<5ng/g。阮祥春等建立了蜂蜜中林可霉素残留的HPLC-ESI-MS/MS检测方法。色谱柱为Hypersil BDS-C18 250mm×4.6mm，检测波长204nm，流动相为20mmol/L乙酸氨水溶液-甲醇(50+50，v/v)，电离方式为ESI正离子扫描，检测方式为多反应监测(MRM)。在2.5ng/g、5.0ng/g、10.0ng/g三个添加水平，林可霉素的平均回收率为95.1%±3.3%，日内测定结果的RSD小于5.3%，日间测定结果的RSD小于8.5%，LOD为0.1ng/g。

Bogialli等建立了一种简单、快速的确证方法检测鸡蛋中的三种MALs。该分析方法只需要进行一步乙腈提取即可以进行LC-MS/MS检测。以交沙霉素为内标定量，MALs的回收率可以达到85%～102%，LOQ为0.2～0.5ng/g，RSD不高于13%。Spisso等建立了鸡蛋中聚醚类、MALs和林可霉素类等三类抗生素的LC-MS/MS检测方法。该方法直接采取乙腈提取，不需要任何净化步骤。质谱采取正离子、MRM模式采集数据，LOD可达到0.04～1.6μg/kg，LOQ为0.14～5.3μg/kg，红霉素(浓度为5μg/kg)的RSD为18.6%，林可霉素(浓度为75μg/kg)的RSD为20.2%。

Aguilera-Luiz等报道了用UPLC-MS/MS同时检测了牛奶中的18种兽药(包括MALs、喹诺酮类和磺胺类等)。该方法只需要经过乙腈进行一次提取，而不需要经过任何净化步骤，回收率可以达到70%～110%，LOD为1～4μg/kg。郭春海等建立了牛奶和奶粉中6种MALs的残留检测方法，该方法采用乙腈提取目标物，OasisHLB固相萃取柱净化，液相色谱-串联质谱测定，外标法定量。牛奶中6种MALs的LOQ为1μg/kg，奶粉的LOQ为8ug/kg；6种分析物在0～100ug/L浓度范围内呈良好线性，线性相关系数>0.992；添加回收率在88.3%～104.4%之间，RSD在3.67%～8.52%之间。谢丽琪等建立了牛奶中洁霉素、氯洁霉素、红霉素、螺旋霉素、交沙霉素、泰乐菌素、竹桃霉素等7种林可酰胺类及大环内酯类药物残留量的确证方法。用乙腈萃取样品中7种林可酰胺类及大环内酯类抗生素，然后用正已烷脱脂，旋转蒸发仪浓缩，以Luna C18色谱柱分离，在正离子模式下以ESI串联质谱仪进行测定。在20μg/kg、50μg/kg、200μg/kg三个浓度水平进行验证试验，方法的线性范围为20～200μg/kg，总体平均回收率为74.5%～97.5%，RSD为2.7%～11.3%。

Chiaochan等建立了鸡肉中多种药物(包括2种林可胺类药物和4种MALs)的LC-MS/MS检测方法。使用2% TCA的水-乙腈混合物(1+1，v/v)进行提取，正已烷除脂后进行LC-MS/MS分析。在0.5MRL、MRL、1.5MRL的添加浓度水平，回收率为53%～99%，检测限范围为0.1～10μg/kg。Chicoa等使用0.1mol/L EDTA和水-甲醇的混合物进行鸡肉样品中MALs提取，不需经过净化处理环节，采用WatersAcquity UPLC-MS/MS进行分析。方法性能指标满足欧盟指令要求。Codony等利用水和甲醇的混合物(含偏磷酸)进行分析物的提取，阳离子交换SPE柱进行净化处理，C18柱分离，水和乙腈(含三氟乙酸)作为流动相，ESI正离子模式进行质谱分析。该方法的回收率可达56%～93%，RSD小于12%，完全满足欧盟残留标准要求。Draisci等报道了同时检测牛组织中残留的替米考星、泰乐菌素和红霉素等3种MALs的LC-MS/MS检测方法。替米考星、泰乐菌素和红霉素的LOQ分别为：20ug/kg(肌肉)和150ug/kg(肝、肾)，300ug/kg(肌肉)和40μg/kg(肝、肾)，50μg/kg(肌肉、肝)和80μg/kg(肾)。邱元进等建立了畜禽产品中维吉尼亚霉素M1和S1的残留检测方法。样品以甲醇-乙腈溶液(1+1，v/v)提取，上清液经0.01mol/L磷酸二氢铵溶液稀释后，OasisHLB固相萃取小柱净化，LunaC18色谱柱分离，以乙腈和含0.1%甲酸的5mmol/L乙酸铵水溶液作为流动相进行梯度洗脱，ESI正离子模式电离，MRM模式检测，外标法定量。该方法对两物质线性范围均为0.15～10.0μg/L，相关系数2均大于0.99；LOQ均为0.25μg/kg；在不同基质中，0.25μg/kg、0.50μg/kg、2.5μg/kg三个添加水平的平均回收率范围为71.2%～98.4%，精密度范围为3.6%～15.4%。Rezende等优化了固相萃取结合LC-MS/MS测定肾脏中林可霉素、克林霉素、替米考星、红霉素和泰乐菌素残留的分析方法，并对该方法监测和控制动物源食品中这些抗生素的可靠性进行了验证。应用LC-MS/MS在正电离模式测定分析物并依据欧盟2002/657/EC对方法进行确认。方法CCa值的范围为5.3%～21.1%，高于MRLs；添加水平范围为0.5～1.5倍MRL时，所有分析物的添加回收率高于92.5%，方法重复性(n=54)和重新性(n=108)分别小于21.6%和21.4%。

刘永涛等建立了水产品中喹烯酮、喹乙醇和5种MALs同时测定的LC-MS/MS方法。以乙腈-10mmol/L甲酸铵溶液为流动相，流速为0.3mL/min，以Hypersil GOLD为色谱分离柱，用配有ESI的三重四极杆质谱在正离子、MRM下采集数据，进行定性定量分析。在1～1000ng/mL范围内，7种药物线性关系良好；在鲫鱼、南美白对虾和甲鱼的空白肌肉中以2～10μg/kg浓度添加时，方法回收率为67.52%～108.89%，RSD为4.2%～14%；LOD为1μg/kg，LOQ为2μg/kg。徐锦忠等建立了水产品中MALs(红霉素、罗红霉素、替米卡星、泰乐菌素、北里霉素、交沙霉素、竹桃霉素、螺旋霉素和林可胺类药物(林可霉素和氯林可霉素)的LC-ESI-MS/MS检测方法。在SRM模式下进行信号采集，MALs的LOD为0.1～0.2μg/kg，LOQ为1.0ug/kg，在虾、鳗鱼和带鱼中的平均回收率为64%～114%，RSD均小于12%。苏秀华建立了水产品中替米考星的HPLC和LC-MS/MS方法，并进行了两种方法的比较。前者的LOQ可以达到20μg/kg，后者则能够达到5μg/kg。HPLC法中替米考星在0.02～2.0ug/g添加范围内，平均回收率为78.90%～85.17%；LC-MS/MS法中，加标0.2ug/g时，样品回收率为70.14%～93.12%。

Dubois等还建立了同时检测组织(肌肉、肝、肾)、鸡蛋和牛奶中替米考星、泰乐菌素、红霉素、螺旋霉素和交沙霉素等5种MALs残留的LC-ESI-MS/MS方法。采用Purospher C18柱分离，0.1mol/L乙酸铵和乙腈为流动相，梯度洗脱，流速0.7mL/min，ESI正离子在MRM模式监测。所有样品监测4个子离子，离子比重现性在2.4%～15%范围；所有药物灵敏度由于1/2MRL。Sin等建立了一种灵敏检测牛奶和动物组织中林可胺类药物的LC-ESI-MS/MS方法。样品经乙腈进行两次提取后，用正已烷除脂，然后用C18分析柱分离，甲酸、乙腈和甲酸铵溶液为流动相，流速0.2mL/min在25～3000μg/kg浓度范围内，具有较好的线性，平均回收率可达到94.4%～107.8%，CV为1.3%～7.8%。

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