吡唑酮类药残留测定——气相色谱-质谱法

时间：2023-03-25 00:52:59来源：food栏目：食品快速检测阅读：

吡唑酮类药残留测定——气相色谱-质谱法

[db:作者] / 2022-12-20 00:00

(5)气相色谱-质谱法(gas chromatography-massspectrometry，GC-MS)

GC-MS可以得到质量、保留时间和强度的三维信息，实现了高通量、高效率定性与定量分析。GC-MS分析前往往需要将羟基、羰基等极性基团进行烷基化衍生后再测定。

1)气相色谱-单四极杆质谱法(GC-MS)

Singh等建立了测定血浆和尿液中保泰松的GC-MS测定方法。样品净化后吹干，加双(三甲基硅基)三氟乙酰胺(BSTFA)于室温衍生后进样，进样量1μL，不分流进样，GC-MS色谱柱为毛细管柱SE-54(30m×0.25mm)，升温程序：起始温度150℃，以20℃/min升至280℃，维持15min，进样口温度250℃，电子轰击电离(EI)，选择离子(SIM)检测，每个药物检测3个离子。方法回收率为110%～120%，CV小于5%，LOD为50ng/mL。BSTFA的优点是衍生化反应不用加热，室温即可进行。

Taylor等采用GC-MS确证分析马血液中保泰松和羟布宗的HPLC测定结果。净化吹干后的样品中加入N-甲基-N-(三甲基甲硅烷基)三氟乙酰胺(MSTFA)和0.2mol/L三甲基氢氧化铵的甲醇溶液，立即进GC-MS分析，在程序升温中进行柱上(on-column)甲基化衍生，生成甲基化保泰松和二甲基化羟布宗。色谱柱为SE-54毛细管柱(30m×0.25mm，0.25μm)，进样口温度250℃，不分流进样70s，载气为氦气，压力15psi，升温程序：恒温100℃，维持2min，以21℃/min升温至320℃，维持7.5min，质谱传输线温度290℃，离子源温度175℃，全扫描检测，扫描速度60～450amu/s血液中保泰松和羟布宗可确证LOD为4μg/mL。该方法采用在线衍生，克服了硅烷化衍生物不稳定的缺点。

Hines等建立了马血液中保泰松的GC-MS分析方法。样品提取物用三甲基氢氧化硫-甲醇溶液(0.2mol/L)在80℃下甲烷化衍生20min，GC-MS测定，GC色谱柱为ZebronZB5(30m×0.25mm，0.25μm)，载气为氦气，流速1.1mL/min，不分流进样，进样口温度260℃，分流时间为1.0min，升温程序：起始温度90℃，维持1min，以15℃升至320℃，维持6min，质谱离子源温度250℃，传输线温度280C，离子能量70eV，EI电离源，SIM检测。方法回收率为102%～104.2%，CV为3.2%～3.9%，LOD为53ng/mL。该方法克服了在线衍生化色谱峰形展宽问题。

Gonzalez等用GC-MS测定了马血液和尿中保泰松和羟布宗等17种药物。用碘甲烷和无水碳酸钾在60℃下甲烷化衍生90min，GC-MS测定。色谱柱为硅胶交联包被聚甲基硅氧烷(25m×0.2mmid，0.1μm)，载气为氦气，流速0.65mL/min，进样口和检测器温度280℃，升温程序：起始温度100℃，以25℃/min升至200C，以15℃/min升至300℃，维持2.3min，总运行时间13min，进样体积2μL，分流比10：1，EI离子源，SIM检测。在两种基质中，保泰松和羟布宗的LOD分别为25ng/mL和10ng/mL；血浆样品的回收率为41%～51%，尿液样品的回收率为42.9%～68%。甲基化衍生化产物可稳定保存1周，比硅烷化衍生物稳定性大大提高。

2)气相色谱-串联质谱法(GC-MS/MS)

与单极质谱相比，串联质谱(MSMS)选择性更高，可用于高基质背景下痕量目标化合物的定量。

Dowling等采用GC-MS/MS分析牛乳中保泰松等药物的残留量。乳样净化洗脱液吹干后，用七氟丁酸酐(HFAA)-六氟异丙醇(HFPOH)于60℃衍生45min，吹干后，用辛烷溶解，GC-MS/MS测定。色谱柱为SE-54/CPSil 8型，进样口温度275℃，进样体积2μL，起始温度100℃，维持1min，以10℃/min升至300℃，维持1min，运行时间22min；电子能量70eV，检测器电压1950V，碰撞池压力1.5 mTorr，离子源温度250℃，传输线温度290℃，EI电离，采集正离子，串联质谱多反应监测(MRM)模式检测。保泰松的CCa为0.70 ng/mL，CCβ为1.19 ng/mL，回收率为105%，CV小于6.7%。技术指标符合欧盟2002/657/EC指令要求。

Engel等研究安替比林代谢途径，应用体外肝微粒体酶于37℃孵育15 min，然后测定安替比林代谢物。孵育液用二氯甲烷提取，NORA、OHA、HMA用N- (特丁基二甲基硅) -N-甲基三氟乙酰胺(MBDSTFA)在室温衍生，GC-MS/MS 测定。色谱柱为毛细管柱DB5 (30 m×0.25 mm， 0.25 um)，不分流进样，进样口温度280℃，起始温度80℃，维持1 min，以30℃/min升至300℃，维持15 min； EI离子源，检测正离子，电离源温150℃，电离能70 eV，发射电流200 μA，碰撞池氩气气压160 MPa，MRM模式检测。NORA、OHA、HMA的CV分别为19.4%、14.6%和 20.7%，回收率为80%～ 120%， LOQ均为5 ng/mL。

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