磺胺类药物残留测定方法（三）

时间：2023-03-25 07:55:20来源：food栏目：食品快速检测阅读：

磺胺类药物残留测定方法（三）

[db:作者] / 2022-12-08 00:00

3)质谱检测器(MSD)

随着液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)的发展，特别是色谱-质谱接口技术的完善和超高效液相色谱-串联质谱技术(UPLC-MS/MS)的出现，LC-MS已经大量应用于SAs的残留分析，成为目前SAs最灵敏的分析检测手段。在LC-MS分析中，一般采用尺寸较小的柱子，以乙酸或其他有机酸调节流动相的pH以便于汽化。SAs测定通常采用电喷雾(ESl)接口，正离子扫描。

Shao等建立了猪组织(肉、肝、肾)中17种SAs的LC-MS/MS检测方法。样品用无水硫酸钠除水，乙腈提取，正己烷除脂，Sep-Pak硅胶柱净化后，LC-MS/MS检测，甲醇-0.1%甲酸溶液为流动相，梯度洗脱，ESr、MRM模式监测。方法回收率在52%～120%之间，LOD在0.01～1.0ug/kg之间。金明等建立了牛肝中7种SAs残留量的UPLC-MS/MS测定方法。样品经乙庸提取后，过MCX阳离子交换SPE柱净化，利用UPLC-MS/MS检测。色谱柱为ACQITY UPLCTMC18柱，进样体积5uL，流动相为0.2%甲酸甲醇溶液-0.2%甲酸溶液，梯度洗脱，ESI、MRM模式监测。该方法LOD为0.02ug/g；加标回收率为70.6%～112.5%，RSD为2.6%～14.3%。我国国家标准GB/T20759-2006规定了畜禽肉中16种SAs残留的检测方法。用乙腈提取，正己烷脱脂后，LC-MS/MS检测。色谱柱为Lichrospher 100RP-18(5um，250mm×4.6mmi.d.)，流动相为乙腈-0.01mol/L乙酸铵溶液(12+88，v/v)，流速0.8mL/min，柱温35℃，进样量40uL，分流比1：3，ESI+、MRM模式监测，外标法定量。方法LOQ为2.5～40.0ug/kg：添加水平2.5～600.0ug/kg范围，回收率在65.9%～110.1%之间，RSD在2.63%～12.67%之间。

刘正才等建立了快速测定级鱼中11种SAs残留量的UPLC-MS/MS方法。采用乙腈-二氯甲烷混合溶剂提取，SPE柱净化后，以UPLC-MS/MS测定。色谱柱为Acquity UPLCBEHC18柱，流动相为5mmol/L乙酸铵-0.2%(体积分数)甲酸和甲醇，梯度洗脱，流速0.2mL/min，进样量10uL，ESl+、MRM模式分析，外标法定量。该方法的线性范围为0～50ug/kg，相关系数均大于0.990；在2.0ug/kg、5.0 ug/kg、10 ug/kg、20 ug/kg添加水平范围内的回收率为63%～95%，RSD为1.0%～10.0%；LOQ均小于6ug/kg。我国国家标准GB/T22951-2008规定了豚鱼、鳗鱼中18种SAs残留量的LC-MS/MS测定方法。用乙腈提取，用正已烷脱脂后，供LC-MS/MS测定。色谱柱为Atlantis Cl8(3um，150mm×2.1mm)，流动相为乙腈-0.1%甲酸-甲醇，梯度洗脱，流速0.2mL/min，柱温35C，进样量20uL，ESI+、MRM模式监测，内标法定量。方法LOQ均为5.0ug/kg；在添加水平5～50.0ug/kg范围内，回收率在65.9%～110.1%之间，RSD在2.63%～12.67%之间。

郭伟等应用UPLC-MS/MS分析牛乳中24种SAs残留。样品经改良的QuEChERS技术提取和净化，采用BEH C18色谱柱分离，0.25%乙酸和乙腈作为流动相进行梯度洗脱，UPLC-MS/MS在ESI正离子、MRM模式下检测。24种药物在5～100ug/kg浓度范围内线性良好，相关系数r均大于0.99；在5～50ug/kg添加浓度水平，平均回收率在64.2%～110.9%之间，RSD为3.2%～13.1%；方法LOD为0.21～1.62ug/kg。余永新等利用UPLC-MS/MS联用技术，建立了一种能在10min内快速分离和测定牛奶中24种SAs残留的方法。样品经匀浆、超声、乙腈重复提取、氮吹浓缩，流动相溶解，饱和正己烷脱脂。采用ACQUITY UPLCTMBEHC18柱分离，以乙腈-0.2%乙酸为流动相，梯度洗脱，目标分析物使用UPLC-MS/MS进行测定。以保留时间和离子对进行定性和定量，在ESI+和MRM监测模式下进行样品分析。该方法LOD为0.04～1.35ug/kg，在1～200ug/L范围内线性关系良好，回收率为61%～117%，RSD为2.92%～18.98%。我国国家标准GB/T22966-2008规定了牛奶和奶粉中16种SAs残留量的LC-MS/MS测定方法。用高氯酸溶液提取，Oasis HLB固相萃取柱净化，LC-MS/MS测定。色谱柱为C18(5um，150mm×2.1mm)柱，柱温30℃，进样量10uL，流动相为0.1%乙酸-甲醇，梯度洗脱，流速0.2mL/min，ESl+、MRM模式扫描。外标法定量。方法LOQ为1.0～4.0ug/kg；牛奶回收率在72.2%～94.9%之间，RSD在3.12%～8.45%之间：奶粉回收率在79.1%～95.9%之间，RSD在2.35%～7.89%之间。

Thompson建立了蜂蜜中7种SAs的LC-MS/MS分析方法。样品经酸水解后，过滤，直接进LC-MS/MS检测。采用梯度洗脱程序，在线自动净化，通过六通阀切换将净化后的分析物注入质谱系统。该方法回收率为93.3%～101.9%，LOD为0.5～2ug/kg。我国国家标准GB/T 18932.17-2003规定了蜂蜜中16种SAs的残留检测方法。用pH2磷酸溶液提取，经阳离子交换柱和Oasis HLB固相萃取柱净化后，用LC-MS/MS检测。色谱柱为Lichrospher*100RP-18(5um，250mm×4.6mmi.d.)，流动相为乙腈-0.01mol/L 乙酸铵溶液(12+88，v/v)，流速0.8mL/min，柱温35℃，进样量40uL，分流比1：3，ESI+、MRM模式监测。在添加水平1.0～300.0ug/kg内，其回收率在70%～110%之间，RSD在2.65%～11.52%之间：LOD为为1.0～12.0ug/kg。我国国家标准GB/T22947-2008/9引规定了蜂王浆中18种SAs残留量的LC-MS/MS测定方法。用去离子水提取，三氯乙酸沉淀蛋白，Oasis MCX离子交换柱净化后，LC-MS/MS测定。色谱柱为Atlantis C18(3um，150mm×2.1mm)，流动相为乙腈-0.1%甲酸-甲醇，梯度洗脱，流速0.2mL/min，柱温35℃，进样量20uL，ESI+、MRM模式监测，内标法定量。方法LOQ均为5.0ug/kg；添加水平5.0～50.0ug/kg 范围，回收率为74.9%～123.0%，RSD为2.12%～8.91%。

刘佳佳等利用LC-MS/MS联用技术，建立了一种在28min内快速分离和测定鸡肉、猪肉、牛肉、羊肉、蜂蜜、牛奶中24种SAs残留的方法。样品用乙腈和乙酸乙酯提取，经正己烷LLP净化后，进LC-MS/MS分析。采用EclipseXDB-C18色谱柱，柱温30℃，样品温度25℃，进样体积5uL，流动相为乙腈和0.2%乙酸溶液，流速0.20mL/min，梯度洗脱，ESI正离子扫描，MRM模式检测。该方法LOD为0.27～7.45ug/kg，LOQ为0.957～9.89ug/kg；在5～300ug/L范围内线性关系良好，在10ug/kg、20ug/kg、50ug/kg三个添加浓度上的回收率为60.8%～122.9%，RSD为0.01%～19%。

Huang等建立了一种液相色谱-四极杆串联线性离子阱质谱(LC-QqLIT)方法，分析动物组织中的SAs。样品处理采用快速单管提取/多组分分配吸附净化技术(SEP/MAC)，LC-QqLIT在正离子化模式下进行66Da(NLS)中性丢失扫描及m/z108母离子扫描(PreS)，获得SAs全面的质子化分子离子峰，其中包括N-乙酰基和羟胺代谢产物以及其可能的二聚体。另外，母离子扫描引起的结果自动提高了子离子谱图的采集，并且能够在一次分析中同时筛查、描绘和确认大量SAs。该方法的准确度(67%～116%)、精密度(RSD<25%)和灵敏度(LOQ≤7.5ng/g)能满足SAs的检测标准。通过将基质独立SEP/MAC方法和具有多参数匹配算法的低分辨LC-QqLIT结合，可以作为一个有价值的半定向筛查方法，用于快速筛查和对实际样品进行可靠的定量/确证分析。Heller等还建立了同时检测鸡蛋中15种SAs的LC-MSn分析方法。样品用乙腈提取，经C18 SPE柱净化后，用LC-MS2测定。该方法的确证浓度可以达到5～10ng/g，定量范围在50～200ppb之间。

液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(LC-qTOF-MS)也开始用于SAs的筛选检测。Turmipseed 等开发了LC-qTOF-MS筛查牛奶中多种SAs的方法。样品用乙腈提取，分子量截留过滤器净化后，用LC-qTOF-MS检测：采集TOF的MSl数据，通过保留时间和准确质量数筛查，准确度可以达到97%，在关注水平的线性和回收率都可以接受。另外，[M+H]+离子的二级质谱数据被用于确证。Peters 等采用LC-qTOF-MS建立了鸡蛋、鱼、肉中100种兽药(包括SAs)的筛查方法。该方法线性良好，回归系数平方大于0.99；在4～400ug/kg浓度范围，平均质量误差为3ppm，平均SigmaFit值为0.04；方法回收率在70%～100%之间，重复性为8%～15%，重现性为15%～20%：灵敏度满足限量要求。

上一篇：磺胺类药物残留测定方法（二）

下一篇：磺胺类药物残留测定方法（四）